氨酰
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氨基酸分子去掉羥基后,剩下的一價(jià)原子團(tuán)統(tǒng)稱為氨酰?! ?/p>
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氨酰—tRNA合成酶
當(dāng)密碼子“GCG”與tRNA上的反密碼子“CGC”配對(duì)時(shí),這就意味著tRNA攜帶丙氨酸到核糖體上來了。 這不需要經(jīng)過檢測(cè),因?yàn)槊糠NtRNA分子在它到達(dá)核糖體之前就與相應(yīng)的氨基酸結(jié)合了。這種結(jié)合是在一系列被稱為氨酰-tRNA合成酶作用下完成的。 這些酶可以將正確的氨基酸裝載到相應(yīng)的tRNA分子上,于是,tRNA就可以執(zhí)行它從DNA的脫氧核糖核苷酸序列信息到蛋白質(zhì)的氨基酸序列信息的翻譯功能。
二十種酶
大多數(shù)細(xì)胞可產(chǎn)生二十種不同的氨酰-tRNA合成酶,每一種酶負(fù)責(zé)一種氨基酸。它們各不相同,各負(fù)其責(zé),使一種氨基酸與其相應(yīng)的一套tRNA分子結(jié)合。如圖所示,天冬氨酰-tRNA合成酶(用藍(lán)色和綠色表示,兩個(gè)tRNA分子以紅色表示)是一個(gè)由兩個(gè)相同亞基構(gòu)成的二聚體,其他的酶是或大或小的單體,或是二聚體。有的甚至是一種或多種不同亞基構(gòu)成的四聚體。某些酶具有相當(dāng)奇特的構(gòu)造,例如,絲氨酰-tRNA合成酶(蛋白質(zhì)編號(hào)1SET)。幾乎所有氨酰-tRNA合成酶的結(jié)構(gòu)都可以在蛋白質(zhì)立體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)中找到?! ?/p>
尋找合適的伙伴
正如人們所預(yù)料的,這其中的許多酶識(shí)別tRNA分子的反密碼子。但在某些情況下有所不同。以絲氨酸為例,它有六種不同的密碼子,所以絲氨酰-tRNA合成酶必須能識(shí)別帶有六種不同反密碼子的tRNA分子,包括完全不同的“AGA”、“GCU”。于是,酶不得不辨別tRNA分子上的氨基酸接受臂和其他部位的堿基,尤其是在tRNA序列編號(hào)為73的堿基,似乎在很多情況下起著極其重要的作用,因此被稱為區(qū)別堿基。但有時(shí),它可以完全被忽略。應(yīng)注意的一點(diǎn)是,每個(gè)酶在正確識(shí)別tRNA分子的同時(shí),必須阻止錯(cuò)誤組合。因此,每一個(gè)tRNA分子都有一套促進(jìn)與正確的酶結(jié)合的積極因子,也有一套抑制不適當(dāng)結(jié)合的消極因子。例如,天冬氨酰-tRNA合成酶,如圖所示(蛋白質(zhì)編號(hào)1ASZ)能識(shí)別tRNA分子的區(qū)別堿基和反密碼子周圍的四個(gè)堿基,而另一個(gè)堿基,鳥嘌呤37,不用于識(shí)別,但必須通過甲基化保證tRNA分子不會(huì)與精氨酰-tRNA合成酶錯(cuò)誤結(jié)合?! ?/p>
驚訝于基因組分析
近來,對(duì)整個(gè)基因組分析的結(jié)果,讓人們非常吃驚:有些有機(jī)體并不存在全部編碼這二十種氨酰-tRNA合成酶的基因。但它們確實(shí)是用這二十種氨基酸去構(gòu)建蛋白質(zhì)的。有機(jī)體對(duì)這個(gè)矛盾的解決表明,有更復(fù)雜的機(jī)制存在。這種現(xiàn)象經(jīng)常出現(xiàn)。例如,某些細(xì)菌不存在將谷氨酰胺裝載到相應(yīng)tRNA上的合成酶。但它可以用一種酶將谷氨酸加到所有的谷氨酸t(yī)RNA分子上和所有的谷氨酰胺tRNA分子上,然后,另一種酶作用于谷氨酰胺tRNA分子,將谷氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)楣劝滨0?,從而形成正確的配對(duì)組合?! ?/p>
條條大路通羅馬
了五種氨酰-tRNA合成酶與其tRNA分子的復(fù)合體。tRNA分子(以紅色表示)以相同的方向排列。注意,不同的酶是從不同的角度接近tRNA分子的。作用于異亮氨酸(蛋白質(zhì)編號(hào)1FFY)、纈氨酸(蛋白質(zhì)編號(hào)1GAX)和谷氨酰胺(蛋白質(zhì)編號(hào)1EUQ)的合成酶像是tRNA分子的搖籃,抓住反密碼子環(huán)(在tRNA分子底部),并將氨基酸接受臂(在tRNA分子右部頂端)置于它的活性部位。這些酶有相似的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),類似的作用方式,并且都將氨基酸加在tRNA分子末端核糖的2'-羥基上,被稱為“類型Ⅰ”酶。而作用與苯丙氨酸(蛋白質(zhì)編號(hào)1EIY)和蘇氨酸(蛋白質(zhì)編號(hào)1QF6)的酶屬于“類型Ⅱ”,它們從另一側(cè)接近tRNA,并將氨基酸加到tRNA末端核糖的3'-羥基上。
高保真
氨酰-tRNA合成酶執(zhí)行其功能時(shí),必須有很高的準(zhǔn)確性。它們?nèi)绻噶隋e(cuò)誤,將會(huì)導(dǎo)致氨基酸在蛋白質(zhì)合成中的錯(cuò)誤定位。這些的出錯(cuò)率為萬(wàn)分之一。對(duì)于絕大多數(shù)氨基酸,這個(gè)準(zhǔn)確率不難達(dá)到。因?yàn)椋鱾€(gè)氨基酸之間有很大的不同。而且,前面曾提到過,不同tRNA分子的許多部位都可用于正確識(shí)別。但是,在某些情況下,酶難于選擇正確的氨基酸而必須求助于特殊機(jī)制。
異亮氨酸正是這樣一個(gè)例子。在酶中,有一個(gè)能識(shí)別異亮氨酸的小洞,這個(gè)洞太小,而不宜讓像甲硫氨酸和苯丙氨酸這樣的大分子進(jìn)入,并且,這個(gè)洞是疏水的,帶有極性側(cè)鏈的氨基酸,也被阻擋在外。但是比異亮氨酸稍小的纈氨酸,由于僅比它少了一個(gè)甲基,剛好能進(jìn)入這個(gè)口袋。纈氨酸代替異亮氨酸的幾率為一百五十分。這個(gè)錯(cuò)誤率太高了。于是必須有校正機(jī)制出馬。異亮氨酸合成酶(蛋白質(zhì)編號(hào)1FFY)用有校正作用的另一個(gè)活性部位來解決這個(gè)難題。錯(cuò)誤的纈氨酸,而不是異亮氨酸能靠近這個(gè)活性部位。這樣,纈氨酸被水解掉,留下tRNA分子,等待正確的異亮氨酸。這個(gè)校正步驟將總的錯(cuò)誤率降到三千分?! ?/p>
探索結(jié)構(gòu)
這些酶作用于tRNA分子時(shí)并不十分溫柔。谷氨酰-tRNA合成酶作用于它的tRNA分子(蛋白質(zhì)編號(hào)1GTR)時(shí)的結(jié)構(gòu)就是一個(gè)很好的例證。該酶緊緊的抓住反密碼子,為了更好的辨認(rèn),將這三個(gè)堿基盡量分開,在tRNA分子的另一端,酶解開最初的一個(gè)堿基對(duì)(圖上所示向上彎曲),并將鏈的長(zhǎng)長(zhǎng)的接受臂扭成一個(gè)較緊的發(fā)卡(圖上所示向下彎曲)。這樣,使得最后一個(gè)核苷酸的2'羥基處于酶的活性部位。此時(shí),ATP和氨基酸(在此結(jié)構(gòu)中未顯示)也正處于該部位。
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